口腔細胞

口腔細胞

口腔里的細胞都是有著同樣的形態,功能,統稱為口腔細胞。有牙髓細胞、牙周膜細胞、唾液腺細胞、口腔黏膜細胞、破骨細胞、成骨細胞、軟骨細胞、口腔腫瘤細胞等等。但一般所謂的口腔細胞指的是口腔表皮細胞。各個細胞產生時很相似,經過分化,形態、結構產生差異。

牙髓細胞

口腔細胞牙髓細胞

培養中的細胞成分
成纖維細胞、未分化的間充質細胞。
培養方法:
1取材,2浸泡,3修剪,4鋪瓶,5培養
免疫組織化:
染色波形絲蛋白表達陽性
角蛋白、神經絲蛋白、結蛋白、膠質細胞
原纖維酸性蛋白表達陰性
生長增殖特點:
成功率、快速增殖期、死亡
功能特點:
鹼性磷酸酶活性、礦化現象、對鈣調節因子的作用、對細胞因子的反應、對氫氧化鈣、羥基磷灰石蓋髓劑的反應

牙周膜細胞

口腔細胞牙周膜細胞

培養方法:
1取材,2浸泡,3修剪,4鋪瓶,5培養
培養中的細胞成分:
成纖維細胞、未分化的間充質細胞
免疫組織化染色
波形絲蛋白表達陽性
角蛋白、神經絲蛋白、結蛋白、膠質細胞
原纖維酸性蛋白表達陰性
生長增殖特點:
成功率、快速增殖期、死亡
功能特點:
分泌功能、礦化功能、收縮功能、附著能力、再生能力
增殖分化影響因素:
生長因子、胰島素、纖維粘連蛋白、抗壞血酸、羥基磷灰石

唾液腺細胞

口腔細胞口腔內頰細胞

細胞形態特點:
腺泡上皮細胞、導管上皮細胞、肌上皮細胞
免疫組織化染色:
腺泡上皮細胞:角蛋白、澱粉酶、對氨基水楊酸、導管上皮膜、
前角蛋白、單克隆角蛋白、分泌成分陽性反應
導管上皮細胞:角蛋白、上皮膜蛋白、磷酸酐酶抗體染色陽性反應
肌上皮細胞:肌動蛋白、S-100蛋白、肌凝蛋白抗體染色陽性反應
功能特點分泌功能:
腺泡細胞:澱粉酶、PRP、唾液過氧化物酶、特異蛋白等
腺泡上皮細胞:頂端分泌、基底及側膜分泌
導管細胞:膠原
肌上皮細胞:膠原
唾液腺細胞的增殖分化:
基底潛能幹細胞理論、單細胞全能幹細胞理論、雙細胞亞全能幹細胞理論
增殖分化功能影響因素:
細胞因子、激素、細胞外基質、鈣離子

口腔黏膜細胞

口腔細胞口腔黏膜細胞
培養方法:
組織塊法、酶消化法
免疫組織化染色:
波形絲蛋白表達陰性
多種角蛋白表達陽性
功能
分泌:膠原蛋白和非膠原蛋白、金屬蛋白酶

口腔腫瘤細胞

培養腫瘤細胞生物學特性
腫瘤細胞與體內正常細胞相比,不論在體內或在體外,在形態、生長增值、遺傳性狀等方面都有顯著的不同。生長在體內的腫瘤細胞和在體外培養的腫瘤細胞,其差異較小,但也並非完全相同。
形態和性狀
培養中癌細胞無光學顯微鏡下特異形態,大多數腫瘤細胞鏡下觀察比二倍體細胞清晰,核膜、核仁輪廓明顯,核糖體顆粒豐富。電鏡觀察癌細胞表面的微絨毛多而細密,微絲走行不如正常細胞規則,可能與腫瘤細胞具有不定向運動和錨著不依賴性有關。
生長增殖
腫瘤細胞在體內具有不受控增殖性,在體外培養中仍如此。正常二倍體細胞在體外培養中不加血清不能增殖,是因血清中含有很細胞增殖生長的因子,而癌細胞在低血清中(2%~5%)仍能生長。已證明腫瘤細胞有自泌或內泌性產生促增殖因子能力。正常細胞發生轉化後,出現能在低血清培養基中生長的現象,已成為檢測細胞惡變的一個指標。癌細胞或培養中發生惡性轉化後的單個細胞培養時,形成集落(克隆)的能力比正常細胞強。外癌細胞增殖數量增多擴展時,接觸抑制消除,細胞能相互重疊向三維空間發展,形成堆積物。
永生性
永生性也稱不死性。在體外培養中表現為細胞可無限傳代而不凋亡。體外培養中的腫瘤細胞系或細胞株都表現有這種性狀。

浸潤性
浸潤性是腫瘤細胞擴張性增殖行為,培養細胞仍持有這種性狀。在與正常組織混合培養時,能浸潤入其它組織細胞中,並有穿透人工隔膜生長的能力。
異質性
所有腫瘤都是由有增殖能力、遺傳性、起源、周期狀態等性狀不同的細胞組成。異質性構成同一腫瘤內細胞的活力有差別的瘤組織;處於瘤體周邊區的細胞獲得血液供應多,增殖旺盛,中心區有的細胞衰老退化,有的處於周期阻滯狀態,那些呈活躍增殖狀態的細胞稱幹細胞(StemCells)、只有這些幹細胞才是支持腫瘤生長的成分
細胞遺傳
大多數腫瘤細胞有遺傳學改變,如失去二倍體核型、呈異倍體多倍體等。腫瘤細胞群常由多個細胞群組成,有幹細胞系和數個亞系,並不斷進行著適應性演變。
培養方法
腫瘤細胞培養成功關鍵在於:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面,腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養並無原則差別,初代培養套用組織塊和消化培養法均可。

口腔幹細胞研究

口腔細胞口腔幹細胞
概念
幹細胞(Stemcell)即起源細胞。在細胞的分化過程中,細胞往往由於高度化分而完全失去了再分裂的能力,最終衰老死亡。機體在發展適應過程中為了彌補這一不足,保留了一部分未分化的原始細胞。因此,幹細胞是一類具有自我更新和分化能的細胞。

研究意義
胚胎發育機制及影響因素的研究。用於藥物機理及毒性實驗的研究,減少人體和動物的實驗及臨床研究。將胚胎幹細胞定向分化的細胞用於製造人體細胞、組織和器官
成體幹細胞研究是幹細胞研究中最激動人心的部分。它可以有效地防止組織排斥,可以避免倫理、法律系方面的爭論。
牙髓幹細胞
牙乳頭幹細胞

組織工程的套用

口腔細胞組織工程學
1、 在面重建中的套用
2、引導口腔組織再生
3、組織工程化黏膜在口腔醫中的套用
4、用於人造涎腺的初步研究

細胞培養

口腔細胞口腔細胞
細胞培養:模擬體內的生理環境,在適當的條件下,使活體組織細胞在體外環境存活、生長增殖,並維持其結構功能。
一、培養細胞的形態特點
1、貼壁型細胞:
必須貼附於支持物表面才能生長。大多數培養細胞貼附生長,屬於貼壁依賴性細胞。按照培養細胞的主要形態,可分為幾大類型:
(1)成纖維細胞型
胞體呈梭型或不規則三角形,中央有卵圓形核,胞質突起,生長時呈放射狀、火焰狀、漩渦狀。除真正的成纖維細胞外,凡由中胚層間充質起源的組織,如心肌、平滑肌細胞等等常呈本型狀態。另外,凡培養中細胞的形態與成纖維類似時皆可稱之為成纖維細胞。
(2)上皮型細胞
細胞呈扁平不規則多角形,中央有圓形核,細胞彼此緊密相連成單層膜,生長時呈膜狀移動,起源於內、外胚層的細胞如皮膚表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形態。
遊走細胞型
(3)在支持物上呈散在生長,一般不連成片,胞質常突起,呈活躍遊走或變形運動,方向不規則。此型細胞不穩定,有時難以和其他細胞相區別。
(4)多型細胞型
有一些細胞,如神經細胞難以確定其規律和穩定的形態,可統歸於此類。
2、懸浮型細胞:
於懸浮狀態下即可生長,不需要貼附於支持物表面,見於某些癌細胞和血液淋巴細胞,培養時不貼附於底物而呈懸浮狀態生長或以機械方法使保持懸浮狀態下生長來自血,脾或骨髓在懸浮中生長良好細胞圓形,單個或小細胞團生存空間大,提供數量大,傳代方便(不需消化),易於收穫,可獲得穩定狀態觀察不方便
二、培養細胞的體外生長環境
1、無污染環
2、超淨台:超淨工作檯的工作原理是利用鼓風機驅動空氣遁過高效濾器除去空氣中的塵埃顆粒,使空氣得到淨化。淨化空氣徐徐通過工作檯面,使工作檯內構成無菌環境。
3、壓力蒸汽消毒器:濕熱消毒,用途廣
4、電熱乾燥箱:乾熱消毒(160℃,2小時)。主要用乾玻璃器皿消毒
5、濾器:過濾除菌:大多數培養用液,如人工合成培養基、血清、酶液等均採用濾過法除菌
6、超淨工作檯:為細胞操作提供無菌環境
7、紫外燈:紫外線消毒。主要用於培養室空氣、操作台、塑膠
培養皿和培養板等表面消毒
8、基質:玻璃基質、塑膠、飼養細胞、生物性基質處理培養表面、金屬
9、水:新鮮配置的三蒸水或去離子水
10、平衡溶液:無Ca2+、Mg2+的緩衝液

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